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甲基转移酶dSet1调控果蝇生殖细胞发育 认领
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作者 宣涛 张欣 +2 位作者 李明发 孟和 张小民 《山西农业大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2020年第2期66-71,共6页
[目的]探究表观遗传调控在细胞增殖和分化过程中的调控作用。[方法]雌性果蝇幼虫性腺的发育涉及到原始生殖细胞(PGC)增殖及分化,为细胞生物学研究提供了绝佳的在体研究模型。利用UAS-Gal4二元表达系统和果蝇组蛋白H3K4甲基转移酶dSet1-R... [目的]探究表观遗传调控在细胞增殖和分化过程中的调控作用。[方法]雌性果蝇幼虫性腺的发育涉及到原始生殖细胞(PGC)增殖及分化,为细胞生物学研究提供了绝佳的在体研究模型。利用UAS-Gal4二元表达系统和果蝇组蛋白H3K4甲基转移酶dSet1-RNAi果蝇品系,分别降低果蝇性腺中生殖细胞谱系和体细胞谱系中dSet1表达量,研究表观遗传调控因子dSet1在细胞增殖和分化中的功能。[结果]本研究发现组蛋白H3K4甲基转移酶dSet1参与调控雌性果蝇幼虫PGC有序分化的证据,dSet1表达量下调的三龄期幼虫雌性果蝇,PGC的分化被提前开启。不仅如此,特异性将果蝇性腺体细胞谱系中dSet1下调可致PGC增殖异常,该因型的果蝇性腺中包含更多的PGC。[结论]本研究的结果证明,表观遗传调控因子dSet1参与调控雌性果蝇幼虫性腺发育,以细胞自治性与非自治两种方式调控原始生殖细胞的有序分化,不仅如此,性腺体细胞谱系中的dSet1参与调控原始生殖细胞增殖。 展开更多
关键词 组蛋白甲基转移酶dSet1 果蝇 性腺 原始生殖细胞 分化 增殖
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赖氨酸甲基转移酶2D与人类肿瘤的关系 认领
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《诊断病理学杂志》 2020年第3期209-211,共3页
赖氨酸甲基转移酶2D(KMT2D)负责组蛋白H3第4位赖氨酸(H3K4)化,是一种染色质可及性和转录激活的表观遗传标记。KMT2D在膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肺癌、前列腺癌、乳腺癌、髓母细胞瘤、鳞状细胞癌、卵巢成人型粒层细胞瘤、结直肠癌、淋... 赖氨酸甲基转移酶2D(KMT2D)负责组蛋白H3第4位赖氨酸(H3K4)化,是一种染色质可及性和转录激活的表观遗传标记。KMT2D在膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肺癌、前列腺癌、乳腺癌、髓母细胞瘤、鳞状细胞癌、卵巢成人型粒层细胞瘤、结直肠癌、淋巴瘤等多种肿瘤中异常表达。KMT2D因在不同癌症类型中具有不同的功能和生物学效应。 展开更多
关键词 KMT2D 甲基转移酶 肿瘤
甲基转移酶样蛋白3与肿瘤关系的研究进展 认领
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作者 熊磊 李显永 +2 位作者 张楠 李同海 朗磊 《山东医药》 CAS 2020年第10期83-86,共4页
目前已经发现上百种转录后RNA的修饰方式,其中N6-腺嘌呤(m6A)是真核mRNA最为常见的一种修饰方式。研究表明,m6A一种动态可逆的RNA化修饰方式,由甲基转移酶复合体(METTL3、METTL14、WTAP)、去甲基转移酶(FTO、ALKBH5)、结合蛋白(... 目前已经发现上百种转录后RNA的修饰方式,其中N6-腺嘌呤(m6A)是真核mRNA最为常见的一种修饰方式。研究表明,m6A一种动态可逆的RNA化修饰方式,由甲基转移酶复合体(METTL3、METTL14、WTAP)、去甲基转移酶(FTO、ALKBH5)、结合蛋白(YTHDF1、YTHDF2、YTHDF3、YTHDC1、YTHDC2)等协同调控。甲基转移酶样蛋白3(METTL3)具备独立或与其他甲基转移酶共同催化RNA的m6A修饰形成的能力,是影响m6A修饰水平至关重要的。近年研究表明,METTL3依靠催化m6A修饰途径或者直接与翻译起始因子作用影响肿瘤因的翻译水平,进而调控肿瘤相关蛋白的表达,影响肿瘤细胞的增殖、侵袭、分化等生物学行为,在不同肿瘤中发挥促癌或抑癌的双重作用。此外,METTL3也是肿瘤治疗的一个有效分子靶点。 展开更多
关键词 甲基转移酶样蛋白3 N6-腺嘌呤 肿瘤
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番茄DNA甲基转移酶SlDNMT2因RNAi表达载体的构建 认领
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作者 张玉 汪宏涛 +2 位作者 刘嘉荔 刘永胜 唐晓凤 《安徽农业科学》 CAS 2020年第3期97-100,共4页
DNA化是发生在因5′端5′-CpG-3′胞嘧啶上的DNA共价修饰作用,可调节因转录,与植物的生长、发育、成熟、衰老有着密切关系。DNMT2是首先从拟南芥中发现的DNA甲基转移酶。该研究通过NCBI序列比对获得番茄中DNMT2的同源因SlDNMT... DNA化是发生在因5′端5′-CpG-3′胞嘧啶上的DNA共价修饰作用,可调节因转录,与植物的生长、发育、成熟、衰老有着密切关系。DNMT2是首先从拟南芥中发现的DNA甲基转移酶。该研究通过NCBI序列比对获得番茄中DNMT2的同源因SlDNMT2的编码区序列;通过Primer5设计引物,PCR技术扩增获得SlDNMT2因高度特异性序列(长度约500 bp);利用一系列分子生物学试验研究方法最终成功构建SlDNMT2 RNAi表达载体,并命名为pBI121-35S∷siRNA1-siRNA2。该RNAi表达载体的构建为进一步探究SlDNMT2因在植物生长发育过程中的功能奠定了一定的理论础并提供了一条高效、迅速的载体构建途径。 展开更多
关键词 番茄 DNA SlDNMT2 RNAI 载体构建
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RNA甲基转移酶BCDIN3D的表达与乳腺癌预后的关系 认领
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作者 包昶宇 钟勇 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2020年第1期28-31,共4页
目的探讨RNA甲基转移酶BCDIN3D的表达与乳腺癌患者预后的关系。方法选取2013年6月至2015年1月重庆市红十字会医院收治的乳腺癌患者80例,年龄19~65(46.7±4.7)岁;分子分型Luminal A、Luminal B、ERBB2+、Basal-like型分别10、32、20... 目的探讨RNA甲基转移酶BCDIN3D的表达与乳腺癌患者预后的关系。方法选取2013年6月至2015年1月重庆市红十字会医院收治的乳腺癌患者80例,年龄19~65(46.7±4.7)岁;分子分型Luminal A、Luminal B、ERBB2+、Basal-like型分别10、32、20、18例;肿瘤分期T 0~1、T 2、T 3分别9、34、37例;淋巴结分期N 0~1、N 2、N 3分别9、38、33例。均行标准乳腺癌改良根治术,术中获取乳腺癌组织标本,采用免疫组织化学法(IHC)检测乳腺癌组织中BCDIN3D的表达情况。对患者进行随访,统计总生存期(OS)。采用COX比例风险模型分析乳腺癌患者预后的影响因素。结果80例乳腺癌患者中,BCDIN3D阳性表达者30例(37.5%);BCDIN3D阴性表达者50例(62.5%)。BCDIN3D阳性表达者与BCDIN3D阴性表达者间肿瘤分期和淋巴结分期差异有统计学意义(P<0.05),不同年龄、月经状态、分子分型差异均无统计学意义(P>0.05)。中位随访时间为42(23~64)个月,Kaplan-Meier分析结果显示,BCDIN3D阳性表达者、BCDIN3D阴性表达者的中位OS分别为41.2(95%CI:31.2~46.9)、49.5(95%CI:42.1~51.6)个月,BCDIN3D阳性表达者的OS短于BCDIN3D阴性表达者(χ^2=25.241,P<0.001)。COX分析结果显示,肿瘤分期、淋巴结分期、分子分型、BCDIN3D表达是影响乳腺癌患者OS的独立预后因素(P<0.05)。结论BCDIN3D阳性表达与乳腺癌患者预后不良有关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 预后 RNA甲基转移酶BCDIN3D 总生存期
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丝氨酸羟甲基转移酶对小鼠肝脏缺血再灌注的影响 认领
6
作者 蒋禹 王安康 +1 位作者 白赫 叶明新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期506-512,共7页
目的探索丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)在小鼠肝脏缺血再灌注损伤的表达及作用。方法 SPF级C57BL/6小鼠60只,分为正常组(sham)、生理盐水对照组(NS)、空载腺相关病毒组(AVV-GFP)、及腺相关病毒沉默组(AAV-SHMT2),每组15只。建模前2周尾静... 目的探索丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)在小鼠肝脏缺血再灌注损伤的表达及作用。方法 SPF级C57BL/6小鼠60只,分为正常组(sham)、生理盐水对照组(NS)、空载腺相关病毒组(AVV-GFP)、及腺相关病毒沉默组(AAV-SHMT2),每组15只。建模前2周尾静脉给予注射腺相关病毒及生理盐水,建立小鼠肝脏70%缺血再灌注模型。收集缺血再灌注模型小鼠的血清及肝组织。采用qPCR、Western blot、免疫荧光和免疫组化检测各组AST/ALT的浓度、SHMT2、JNK、NF-κB、Caspase-3及下游炎症因子表达水平的变化。并利用HE染色观察各组肝组织病理损伤,TUNEL法检测细胞凋亡。结果肝脏缺血再灌注后SHMT2表达随时间升高,在24 h达最高(相对表达量为1.5,P<0.05)。肝脏缺血再灌注24 h后,AAV-SHMT2组AST/ALT水平含量(588/416 U/L)均明显高于对照组(416/345 U/L),空载组(387/321 U/L)(P<0.05)。AAV-SHMT2组与对照组和空载组相比,SHMT2水平明显降低(相对表达量为0.24,P<0.05),p-JNK,p-p65水平明显升高(相对表达量为0.80,0.97,P<0.05),炎症因子水平TNF-α、IL-1β与其保持一致升高(相对表达量为1.6,1.2,P<0.05)。空载组和对照组比较无统计性差异(P>0.05)。结论SHMT2在肝脏缺血再灌注中有可能通过抑制JNK通路激活来缓减肝细胞的凋亡以及抑制NF-κB通路过度激活来减轻肝脏缺血再灌注的损伤。 展开更多
关键词 肝脏缺血再灌注 丝氨酸羟甲基转移酶 JNK NF-ΚB
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DNA甲基转移酶1在乳腺癌患者中的表达及意义 认领
7
作者 潘小平 洪晓绿 +4 位作者 孟萍 裴德翠 程延东 姚明媚 王蓉 《微循环学杂志》 2020年第1期34-38,共5页
目的:分析乳腺癌患者外周血中DNA甲基转移酶1(DNA Methyltransferase 1,DNMT1)的表达及其临床意义。方法:本院2018-04-01—2018-11-30期间收治的60例乳腺癌患者(实验组)及同期50例体检健康女性(对照组),采用实时定量PCR(RT-PCR)检测外... 目的:分析乳腺癌患者外周血中DNA甲基转移酶1(DNA Methyltransferase 1,DNMT1)的表达及其临床意义。方法:本院2018-04-01—2018-11-30期间收治的60例乳腺癌患者(实验组)及同期50例体检健康女性(对照组),采用实时定量PCR(RT-PCR)检测外周血中DNMT1 mRNA的表达情况,Western blot检测两组间DNMT1蛋白表达,比较两组间各指标的差异并分析其与患者临床特征的关系。结果:实验组DNMT1 mRNA在外周血中的表达较对照组显著升高(10.31±3.39 vs 4.74±3.10,P<0.01),DNMT1蛋白表达较对照组亦显著升高(38.48±3.80 vs 23.78±2.95,P<0.01);不同临床特征乳腺癌患者外周血中DNMT1 mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DNMT1在乳腺癌患者外周血中高表达,与乳腺癌发生密切相关,但与其发展转移无关。 展开更多
关键词 DNA甲基转移酶1 乳腺癌
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DNA甲基转移酶2在乳腺癌患者中的表达及意义 认领
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作者 潘小平 洪晓绿 +4 位作者 孟萍 裴德翠 程延东 姚明媚 王蓉 《国际检验医学杂志》 CAS 2020年第3期282-284,289共4页
目的检测DNA甲基转移酶2(DNMT 2)因在乳腺癌患者外周血中的表达情况,并分析其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR检测60例乳腺癌患者(实验组)及50例体检健康女性(对照组)外周血中DNMT 2的表达情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测两组... 目的检测DNA甲基转移酶2(DNMT 2)因在乳腺癌患者外周血中的表达情况,并分析其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR检测60例乳腺癌患者(实验组)及50例体检健康女性(对照组)外周血中DNMT 2的表达情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测两组间DNMT 2蛋白表达,并分析DNMT 2与各临床特征之间的关系。结果实验组DNMT 2 mRNA在外周血中的表达(5.785±3.956)与对照组(4.739±2.359)比较,差异无统计学意义(t=1.642,P=0.103),DNMT 2蛋白表达在两组间差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论DNMT 2因和蛋白在乳腺癌患者外周血中表达不明显。 展开更多
关键词 DNA甲基转移酶2 乳腺癌
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组蛋白甲基转移酶EZH2参与淋巴瘤发病机制的研究进展 认领
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作者 甘璐 陈浩 孙建方 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期71-74,共4页
表观遗传学修饰是癌症发生发展的重要原因之一。果蝇zeste因增强子的人类同源物2(EZH2)是表观遗传抑制因子PcG家族的重要成员之一,可对组蛋白H3第27位赖氨酸进行三化,从而参与调控细胞周期、细胞衰老和细胞分化等。近年来,在多种... 表观遗传学修饰是癌症发生发展的重要原因之一。果蝇zeste因增强子的人类同源物2(EZH2)是表观遗传抑制因子PcG家族的重要成员之一,可对组蛋白H3第27位赖氨酸进行三化,从而参与调控细胞周期、细胞衰老和细胞分化等。近年来,在多种实体瘤及B细胞淋巴瘤中检测到EZH2过表达或突变,但EZH2在部分T细胞淋巴瘤中的表达情况和作用机制尚不明确,且其在不同肿瘤发生中的作用机制不完全一致,有待进一步深入研究。 展开更多
关键词 甲基转移酶 淋巴瘤 B细胞 淋巴瘤 T细胞 果蝇zeste因增强子的人类同源物2
水稻C24-甾醇甲基转移酶因OsSMT2的生物信息学分析 认领
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作者 黄小龙 翟立升 闫慧清 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第3期461-468,共8页
【目的】为水稻C-24甾醇甲基转移酶因OsSMT2的进一步研究提供理论参考。【方法】以水稻OsSMT2因为研究对象,通过生物信息学分析方法,对OsSMT2蛋白质的理化性质、结构特点、共表达因的富集、启动子的顺式作用元件及表达模式等进行... 【目的】为水稻C-24甾醇甲基转移酶因OsSMT2的进一步研究提供理论参考。【方法】以水稻OsSMT2因为研究对象,通过生物信息学分析方法,对OsSMT2蛋白质的理化性质、结构特点、共表达因的富集、启动子的顺式作用元件及表达模式等进行分析。【结果】水稻OsSMT2因CDS全长1092 bp,编码1个含363个氨酸的蛋白质,该蛋白质具有甲基转移酶结构域和甾醇甲基转移酶C末端结构域;OsSMT2蛋白质不含信号肽,存在1个跨膜结构域;OsSMT2因的共表达因主要富集到DNA的复制过程和次生代谢物的生物合成等途径中,可能参与植物的抗寒和抗旱过程;OsSMT2因在萌发种子中的表达量最高,在叶片的表达量最低。【结论】水稻OsSMT2因主要在萌发的种子、胚根、胚芽中高表达,参与水稻DNA复制和细胞分裂的主要过程,可作为水稻抗寒和抗旱育种的候选因。 展开更多
关键词 水稻 C24-甾醇甲基转移酶 OsSMT2 生物信息学
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脊尾白虾丝氨酸羟甲基转移酶因的克隆及其表达特征分析 认领
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作者 孙金秋 徐莞媛 +4 位作者 马杭柯 高威 欧阳乐飞 高焕 阎斌伦 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2020年第1期127-134,共8页
本研究根据脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)转录组序列,采用cDNA末端快速扩增技术克隆获得了脊尾白虾丝氨酸羟甲基转移酶因(SHMT)。该因cDNA全长为1855 bp,其中,开放阅读框为1407 bp,5′端非编码区为39 bp,3′端非编码区为409 bp... 本研究根据脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)转录组序列,采用cDNA末端快速扩增技术克隆获得了脊尾白虾丝氨酸羟甲基转移酶因(SHMT)。该因cDNA全长为1855 bp,其中,开放阅读框为1407 bp,5′端非编码区为39 bp,3′端非编码区为409 bp,共编码468个氨酸,预测蛋白质的分子质量为152.55 kDa,理论等电点为4.90。同源性分析显示,脊尾白虾SHMT因与壳类动物真宽水蚤(Eurytemora affinis)同源性最高,为96%。荧光定量分析结果显示,SHMT因在脊尾白虾眼柄、胃、肝胰腺、心脏、鳃、肠、肌肉、腹索神经、皮下脂肪以及卵巢中均有表达,其中,卵巢表达量最高,心脏次之。不同浓度Cd^2+胁迫结果显示,其在低浓度(0.0100、0.0175和0.021 mmol/L)Cd^2+胁迫中的表达模式本一致,呈先升高后下降再升高再下降的趋势;而在高浓度(0.0278 mmol/L)Cd^2+胁迫中,该因表达量很低,甚至不表达,说明高浓度Cd^2+胁迫可以抑制该因的表达,具体机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 脊尾白虾 丝氨酸羟甲基转移酶 因克隆 组织表达 Cd^2+胁迫
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于磁微粒的荧光免疫分析法测定人血清中DNA甲基转移酶1 认领
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作者 陈怡雪 牛闪闪 +3 位作者 李红萍 于斐 吴拥军 刘利娥 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2020年第1期162-167,共6页
DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferases1,DNMT1)负责维持DNA化遗传稳定性,其表达量与多种肿瘤的发生发展密切相关,是一种重要的肿瘤分子标志物。DNA转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)的现有检测方法大多于原核生物建... DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferases1,DNMT1)负责维持DNA化遗传稳定性,其表达量与多种肿瘤的发生发展密切相关,是一种重要的肿瘤分子标志物。DNA转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)的现有检测方法大多于原核生物建立,且局限于实验室研究,因此建立一种高灵敏、高通量测定人血清中DNMT1含量的荧光免疫分析方法(FLISA),以期为癌症早期筛查及临床应用提供新思路。以Fe3O4磁珠为固相载体,采用碳二亚胺/N-羟硫代琥珀酰亚胺(EDC/Sulfo-NHS)键合法分别制备磁性免疫捕获探针Fe3O4@DNMT1小鼠单克隆抗体(Fe3O4@McAbDNMT1)及荧光免疫检测探针5-羧罗丹明@DNMT1兔多克隆抗体(5-TAMRA@PcAbDNMT1)。用红外光谱、紫外-可见(UV-Vis)光谱、 Zeta电位、免疫活性分别表征偶联产物的结构与活性。在此础上,采用双抗体夹心法,检测黑色96微孔板中反应产物的荧光强度,根据荧光强度与DNMT1浓度的关系进行定量分析,并进行方法学评价与比较。实验结果显示,双探针偶联成功,并保持了原抗体的免疫活性。该方法的线性方程y=222.046+48.323x,线性范围0.05~80 ng·mL^-1,相关系数为0.991 4,检出限为0.005 ng·mL^-1,板内、板间的RSD分别为4.7%~8.8%, 1.6%~10.0%(n=6);板内、板间的回收率分别为91.3%~102.4%, 88.0%~98.8%(n=6);方法特异性良好。与联免疫吸附法(ELISA)和磁免疫吸附法(MELISA)相比, FLISA法的检出限最低,灵敏度最高,所需分析时间最短;FLISA法与商品化ELISA试剂盒对15例人血清样品进行分析,差异无统计学意义(p>0.05)。表明本研究所建立的FLISA方法灵敏快速,适用于大批量人血清样品中DNMT1的快速测定,在临床诊断方面具有重要的应用价值和广阔的应用前景。 展开更多
关键词 荧光免疫分析 DNA甲基转移酶1 磁性Fe3O4
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DNA甲基转移酶1和GJB2因多态性与突发性聋易感性研究 认领
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作者 张岩岩 刘华 +1 位作者 宋扬 郭海艳 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期160-164,共5页
目的研究DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)因rs2228612位点和连接蛋白26因(GJB2)rs55704559位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与突发性聋(sudden sensorineural hearing loss,SSHL)易感性的关... 目的研究DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)因rs2228612位点和连接蛋白26因(GJB2)rs55704559位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与突发性聋(sudden sensorineural hearing loss,SSHL)易感性的关系。方法选择2014年5月至2018年10月期间收治的185例SSHL患者作为研究组,其中男92例,女93例,有吸烟史者45例,有饮酒史者54例。选择185例听力正常人作为对照组,其中男96例,女89例,有吸烟史者51例,有饮酒史者58例。采集所有受试者外周血后采用测序法检测DNMT1因rs2228612位点和GJB2因rs55704559位点因型,并分析其与突聋易感性的关系。结果DNMT1因rs2228612位点C等位因是SSHL的保护因素(P<0.05),GJB2因rs55704559位点G等位因是SSHL发生的危险因素(P<0.01);在男性和吸烟人群中观察到DNMT1因rs2228612位点突因型是SSHL风险的保护因素(P<0.05),在女性、吸烟、饮酒人群中观察到GJB2因rs55704559位点突变因型是SSHL易感的危险因素(P<0.05)。结论DNMT1因rs2228612位点和GJB2因rs55704559位点SNP与SSHL易感性相关,这种相关性可能与性别、吸烟、饮酒状态有关。 展开更多
关键词 DNA甲基转移酶1 连接蛋白26 突发性聋 单核苷酸多态性
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亚砷酸钠对HaCaT细胞DNA甲基转移酶的影响及N-乙酰半胱氨酸的干预效应 认领
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作者 韩进美 黄红茜 +2 位作者 李凤敏 张爱华 韩雪 《环境与职业医学》 CSCD 北大核心 2020年第3期205-210,共6页
[背景]砷暴露可致人皮肤病变,砷所致的DNA化改变是其主要的致病机制之一,但砷如何引起DNA化改变目前尚未明确。[目的]本研究以永生化的人皮肤角质形成细胞(HaCaT)为研究对象,检测亚砷酸钠(NaAsO2)暴露对HaCaT细胞DNA甲基转移酶(... [背景]砷暴露可致人皮肤病变,砷所致的DNA化改变是其主要的致病机制之一,但砷如何引起DNA化改变目前尚未明确。[目的]本研究以永生化的人皮肤角质形成细胞(HaCaT)为研究对象,检测亚砷酸钠(NaAsO2)暴露对HaCaT细胞DNA甲基转移酶(DNMTs)m RNA和蛋白表达水平的影响,并探讨砷所致氧化应激与其所致DNMTs mRNA和蛋白表达水平改变之间的关联。[方法]给予HaCaT细胞不同浓度的NaAsO2(0、0.625、1.25、2.50μmol·L^-1)处理,干预组给予10.0μmol·L^-1抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理4 h后加入2.50μmol·L^-1 NaAsO2,染毒时间为72 h。应用免疫荧光法检测细胞活性氧(ROS)含量,生化法检测细胞内丙二醛(MDA)含量,实时荧光定量PCR法检测细胞DNMT1、DNMT3a和DNMT3b mRNA水平,Western blotting法检测DNMTs蛋白水平。[结果]不同浓度NaAsO2处理HaCaT细胞72 h后,HaCaT细胞ROS含量、MDA水平随染毒浓度的增加而升高(F趋势=441.675,P<0.001;F趋势=22.430,P=0.012);1.25、2.50μmol·L^-1浓度组DNMT1 mRNA及蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05)。随染毒浓度的增加,DNMT1m RNA及蛋白表达水平升高(F趋势=30.280,P=0.001;F趋势=40.421,P<0.001),DNMT3a mRNA及蛋白表达水平降低(F趋势=226.283,P<0.001;F趋势=30.848,P=0.001),DNMT3b蛋白表达水平升高(F趋势=15.095,P=0.005);各染毒组DNMT3b mRNA表达水平与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。NAC处理后,与2.50μmol·L^-1 NaAsO2单独处理组相比,Ha Ca T细胞ROS含量、MDA水平、DNMT1 mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05),DNMT3a m RNA及蛋白水平无明显改变(P>0.05),DNMT3b蛋白水平降低(P<0.05),m RNA水平无明显改变(P>0.05)。[结论]NaAsO2可改变HaCaT细胞DNMTs mRNA及蛋白表达水平,这种变化可能与砷所致的氧化应激有关。 展开更多
关键词 亚砷酸钠 HACAT细胞 氧化应激 DNA甲基转移酶
LV-ERK1-RNAi转染人非小细胞肺癌细胞的ERK1/2、DNA甲基转移酶1表达观察 认领
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作者 张恒 孙宇 +2 位作者 刘俊 陈尚威 周华富 《山东医药》 CAS 2020年第3期5-8,共4页
目的观察细胞外信号调节激1因RNA干扰慢病毒载体(LV-ERK1-RNAi)转染后人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞NCI-H1299中细胞外信号调节激1(ERK1)、ERK2、DNA甲基转移酶1(DNMT1) mRNA及ERK1、磷酸化ERK1(p-ERK1)、DNMT1蛋白表达情况。方法体... 目的观察细胞外信号调节激1因RNA干扰慢病毒载体(LV-ERK1-RNAi)转染后人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞NCI-H1299中细胞外信号调节激1(ERK1)、ERK2、DNA甲基转移酶1(DNMT1) mRNA及ERK1、磷酸化ERK1(p-ERK1)、DNMT1蛋白表达情况。方法体外培养NCI-H1299细胞,将细胞随机分为3组,KD组和NC组细胞分别转染LV-ERK1-RNAi、阴性对照病毒,CON组不作处理。转染72 h后,采用荧光显微镜观察细胞荧光率,实时荧光定量因扩增法检测细胞中ERK1/2、DNMT1 mRNA,蛋白免疫印迹法检测细胞中ERK1、p-ERK1、DNMT1蛋白。结果空白对照组细胞无绿色荧光蛋白表达,阴性对照病毒组、LV-ERK1-RNAi组转染效率达80%以上。与NC组、CON组比较,KD组ERK1、DNMT1 mRNA及ERK1、p-ERK1、DNMT1蛋白表达下降(P均<0. 05)。结论 LV-ERK1-RNAi转染后NCI-H1299细胞ERK1、DNMT1 mRNA及ERK1、p-ERK1、DNMT1蛋白表达降低,ERK2表达正常,表明LV-ERK1-RNAi特异敲低ERK1而调控DNMT1的表达。 展开更多
关键词 细胞外信号调节激1 RNA干扰技术 慢病毒载体 非小细胞肺癌 NCI-H1299细胞 细胞外信号调节激1 DNA甲基转移酶1 磷酸化ERK1
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滋养层细胞表面抗原2和DNA甲基转移酶1在鼻咽癌中的表达及与其临床病理特征的相关性分析 认领
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作者 李志伟 缪琴 王为 《解放军医药杂志》 CAS 2020年第5期42-45,共4页
目的分析滋养层细胞表面抗原2(Trop2)和DNA甲基转移酶1(DNMT1)在鼻咽癌(NPC)中的表达及与其临床病理特征的相关性分析。方法回顾性分析本院2014年5月-2019年5月临床确诊的131例鼻咽癌患者的临床资料,对其癌组织及癌旁组织进行染色,检测T... 目的分析滋养层细胞表面抗原2(Trop2)和DNA甲基转移酶1(DNMT1)在鼻咽癌(NPC)中的表达及与其临床病理特征的相关性分析。方法回顾性分析本院2014年5月-2019年5月临床确诊的131例鼻咽癌患者的临床资料,对其癌组织及癌旁组织进行染色,检测Trop2及DNMT1的表达水平,并结合其鼻咽黏膜组织病理分期情况,分析Trop2、DNMT1的表达与其病理特征的相关性。结果 Trop2、DNMT1的阳性定位均于细胞膜,颜色自浅黄色至棕褐色不等,NPC癌组织中Trop2、DNMT1的高表达率显著高于癌旁组织(P<0.05);TNM分期处于Ⅲ~Ⅳ期、伴随淋巴结转移的NPC患者Trop2、DNMT1的表达更高(P<0.05);NPC患者的Trop2、DNMT1表达与其TNM分期、淋巴结转移程度呈正相关(P<0.05)。结论 NPC患者Trop2、DNMT1的表达与疾病严重程度具有相关性,Trop2、DNMT1表达水平越高,患者病情越严重。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 滋养层细胞表面抗原2 DNA甲基转移酶1 肿瘤转移 肿瘤分期 相关性分析
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铁皮石斛咖啡酸-O-甲基转移酶(COMT)密码子偏好模式分析 认领
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作者 王丛巧 彭丽云 +4 位作者 郭艳芳 赵桦 陈青青 林玉玲 赖钟雄 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1462-1471,共10页
咖啡酸-O-甲基转移酶(COMT)是木质素合成过程的关键,参与苯丙烷代谢。了解铁皮石斛COMT(Caffeic acid-O-methyltransferase)因密码子的偏好性可为其功能和分子进化研究提供科学依据。采用Codon W、EMBOSS、SPSS、Origin等分析铁皮石... 咖啡酸-O-甲基转移酶(COMT)是木质素合成过程的关键,参与苯丙烷代谢。了解铁皮石斛COMT(Caffeic acid-O-methyltransferase)因密码子的偏好性可为其功能和分子进化研究提供科学依据。采用Codon W、EMBOSS、SPSS、Origin等分析铁皮石斛COMT的密码子偏好参数,并通过ENC绘图、中性绘图和PR2-plot分析探讨COMT因密码子偏好性形成的可能因素,同时使用SPSS19.0和MEGA6.0进行聚类分析。结果显示,铁皮石斛COMT因ENC值、GC含量以及GC3分别为49、0.452和0.396,表明其密码子偏好性较弱,偏好使用A或T结尾的密码子;ENC、中性绘图分析显示突变压力是COMT密码子偏好性形成的主要作用力;铁皮石斛COMT因和同为兰科植物的香味蝴蝶兰(Phalaenopsis bellina)的亲缘关系最近,两者的GC1s、GC2s、GC3s、GC、CAI和ENC也较为相近,表明物种进化关系上越相近其密码子偏好性也较为相似,但有些物种仍存在一些差异。此外,从密码子使用频率分析得出酵母菌真核表达系统适合铁皮石斛COMT因的异源表达,模式植物烟草、番茄可以作为其遗传转化受体。本研究为COMT因功能进一步研究提供参考。 展开更多
关键词 铁皮石斛 密码子偏好性 咖啡酸-O-甲基转移酶(COMT) 聚类分析
蛋白质精氨酸甲基转移酶5在肿瘤中的研究进展 认领
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作者 窦佳 苏乌云 《医学综述》 2020年第5期924-929,共6页
恶性肿瘤是严重威胁人类健康的重大疾病之一。近年来,对恶性肿瘤的发生、发展及治疗的表观遗传学研究逐渐成为肿瘤分子领域的研究热点,其中蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)是目前研究较多的一种表观遗传学。PRMT5作为一种Ⅱ型PRMT参... 恶性肿瘤是严重威胁人类健康的重大疾病之一。近年来,对恶性肿瘤的发生、发展及治疗的表观遗传学研究逐渐成为肿瘤分子领域的研究热点,其中蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)是目前研究较多的一种表观遗传学。PRMT5作为一种Ⅱ型PRMT参与了多种细胞的生理和病理过程,如调节细胞周期、细胞凋亡、DNA损伤反应等。在多种恶性肿瘤中,PRMT5在细胞的异常表达与肿瘤的发生、发展、转移密切相关,已作为新型抗肿瘤靶点用于相关恶性肿瘤的治疗。 展开更多
关键词 肿瘤 蛋白质精氨酸甲基转移酶5 表观遗传学 靶向治疗
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蛋白质精氨酸甲基转移酶在前列腺癌中的研究进展 认领
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作者 胡平(综述) 陈平(审校) 《癌症进展》 2020年第7期664-667,共4页
蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMT)是在真核生物细胞中广泛分布的甲基转移酶,可通过化组蛋白和非组蛋白的精氨酸残发挥生物学功能。PRMT参与肿瘤的发生、发展,是近年来肿瘤研究领域的新发现,特别是其在前列腺癌中异常表达。PRMT高表... 蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMT)是在真核生物细胞中广泛分布的甲基转移酶,可通过化组蛋白和非组蛋白的精氨酸残发挥生物学功能。PRMT参与肿瘤的发生、发展,是近年来肿瘤研究领域的新发现,特别是其在前列腺癌中异常表达。PRMT高表达促进前列腺癌细胞的生长和迁移。PRMT能与雄激素受体(AR)相互作用,参与AR信号通路,AR信号通路异常被认为是前列腺癌发生的主要原因之一。此外,PRMT通过化组蛋白激活或抑制因的表达,通过化非组蛋白参与Wnt信号通路等。 展开更多
关键词 蛋白质精氨酸甲基转移酶 前列腺癌 雄激素受体 表观遗传
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结直肠癌组织中DNA甲基转移酶-1和钠氢交换子调节因子1的表达、临床意义及相关性 认领
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作者 高晓斌 武雪亮 +4 位作者 赵轶峰 聂双发 梁峰 刘小飞 张迎春 《中国医药导报》 CAS 2020年第2期20-24,共5页
目的探讨结直肠癌组织中DNA甲基转移酶-1(DNMT1)和钠氢交换子调节因子1(NHERF1)的表达、临床意义及相关性。方法选取2017年2月~2018年2月河北北方学院附属第一医院手术切除的结直肠癌(癌组)和癌旁正常组织(正常组)各50例,应用实时荧光... 目的探讨结直肠癌组织中DNA甲基转移酶-1(DNMT1)和钠氢交换子调节因子1(NHERF1)的表达、临床意义及相关性。方法选取2017年2月~2018年2月河北北方学院附属第一医院手术切除的结直肠癌(癌组)和癌旁正常组织(正常组)各50例,应用实时荧光定量逆转录聚合链反应(qRT-PCR)法检测两组DNMT1 mRNA和NHERF1 mRNA的表达,应用免疫组化(IHC)法检测两组DNMT1和NHERF1蛋白的表达,同时收集患者的临床资料,分析二者的表达与临床病理特征间的关系,应用Spearman检验分析两种蛋白间的相关性。结果qRT-PCR法结果显示:癌组中DNMT1 mRNA的表达水平明显高于正常组,而癌组中NHERF1 mRNA的表达水平则明显低于正常组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01);IHC法结果显示:癌组中DNMT1蛋白阳性表达率明显高于正常组,而癌组中NHERF1蛋白阳性表达率明显低于正常组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01);癌组中DNMT1和NHERF1蛋白的表达水平均与病变浸润程度、TNM分期、淋巴结转移及肝转移有关(均P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小和分化程度无关(均P>0.05);Spearman相关分析显示:癌组织中DNMT1与NHERF1呈负相关(r=-0.491,P<0.01)。结论DNMT1高表达和NHERF1低表达在结直肠癌的发生、发展中发挥重要作用,二者均可作为结直肠癌早期诊断和治疗监测的潜在分子生物学指标。 展开更多
关键词 DNA甲基转移酶-1 钠氢交换子调节因子 结直肠癌 逆转录聚合链反应 免疫组化 临床意义
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